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    牛腺病毒3型(BAV-3)試劑盒(熒光-PCR法)

    簡要描述:熒光產品特點:1、靈敏度高,抗污染能力強,定量準確,重復性好;2、樣本處理與PCR擴增在同一個PCR反應管中即可完成;3、無需加熱
    產品說明:1.高便捷性。 2.靈敏度高。 3.特異性強。 4.精密性好。 5.結果準確可靠。 6.嚴格的質量標準。
    結構及組成:聚合酶鏈式反應液(PCR反應液)、RNA
    本試劑盒適用于動物組織以及食品、飼料等樣本中綿羊CYTB基因的檢測

    • 產  地:上海
    • 廠商性質:經銷商
    • 更新時間:2021-09-27
    • 訪  問  量:2502

    詳細介紹

    品牌其他品牌貨號HXG549
    規格50T供貨周期現貨
    主要用途科研使用應用領域生物產業

             牛腺病毒3型(BAV-3)試劑盒(熒光-PCR法)

    【產品名稱】

    通用名稱:牛腺病毒 3 型(BAV-3)核酸檢測試劑盒(熒光 PCR 法)

    NameBovine Adenovirus Detection KitReal-Time PCR Method

    【包裝規格】50T/

    【預期用途】

    牛腺病毒 3 BAV-3)是引起牛呼吸道疾病的主要病原體之一,特別是新生犢牛。臨床癥狀包括發燒,呼吸困難,鼻腔和眼結膜有分泌物等。病理變化主要出現在肺部,具有鮮明的肺小葉、肺氣腫和突變。血清學調查表明該病廣泛分布于世界各地,給養牛業造成巨大經濟損失。

    本試劑盒適用于檢測肺組織、呼吸道及眼鼻分泌物等樣本中的牛腺病毒 3 型,用于牛腺病毒 3 型感染的輔助診斷。

    【檢驗原理】

    本試劑盒采用 TaqMan 探針法實時熒光 PCR 技術,設計一對牛腺病毒 3 型基因保守區特異性引物,結合一條特異性探針,用熒光 PCR 技術對牛腺病毒 3 型基因保守區的 DNA 進行體外擴增檢測,用于臨床上對可疑感染者的病原學診斷。

    【試劑組成】

    包裝規格

                 50T/

    BAV-3 反應液

    500μL×2

    酶液

    50μL×1

    BAV-3 陽性質控品

    50μL ×1

    陰性質控品

    250μL ×1

    說明:不同批號的試劑盒組分不可交互使用。

    【儲存條件及有效期】

    -20±5℃,避光保存、運輸、反復凍融次數不超過 5 次,有效期 12 個月。

    【適用儀器】

    ABI 、安捷倫 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等系列熒光定量 PCR 檢測儀。

    【標本采集】

    捕殺牛:取肺部病變組織,5g;活牛:用滅菌棉拭子沾取牛氣管或眼鼻分泌物,然后置于裝有 0.5mL 生理鹽水的離心管中。

    【保存和運輸】

    上述標本短期內可保存于-20℃,長期保存可置-70℃,但不能超過 6 個月,標本運送應采用 2~8℃冰袋運輸, 嚴禁反復凍融。

    1. 樣品處理(樣本處理區)

    取動物組織及其制品、食品或飼料約 1g,手術剪剪碎混勻后取 0.5g 于研磨器中研磨,加入 1.5mL 生理鹽水后繼續研磨,待勻漿后轉至 1.5mL 滅菌離心管中, 8000rpm 離心 2min,取上清液 100μL 1.5mL 滅菌離心管中。核酸提取

    1.3 核酸提取采用核酸提取或純化試劑磁珠法或離心柱法,請嚴格按照試劑盒說明書進行操作。

    2. 試劑配制(試劑準備區)


    根據待檢測樣本總數,設所需要的 PCR 反應管管數為 N(N=樣本數+1 管陰性對照+1 管陽性對照;樣品每滿 10份,多配制 1 份),每測試反應體系配制如下表:

    步驟

    循環數

    溫度

    時間

    收集熒光信號

    1

    1 cycle

    95℃

    10min

    2

    40 cycles

    94℃

    15sec

    55℃

    30sec

    1. 結果分析判定

    1.1 結果分析條件設定

    設置 Baseline Threshold:一般直接按機器自動分析的結果分析,當曲線出現整體傾斜時,根據分析后圖像調節 Baseline start (一般可在 3~15 范圍內調節)、stop (一般可在 5~20 范圍內調節),以及 Threshold Value (上下拖動閾值線至高于陰性對照),重新分析結果。

    1.2 結果判斷

    陽性:檢測通道 Ct ≤35,且曲線有明顯的指數增長曲線;

    可疑:檢測通道 35<Ct ≤38,建議重復檢測,如果檢測通道仍為 35<Ct ≤38,且曲線有明顯的增長曲線, 判定為陽性,否則為陰性;

    陰性:樣本檢測結果 Ct >38 或無 Ct 值。

    2. 質控標準

    陰性質控品:Ct>38 或無 Ct 值顯示;

    陽性質控品:擴增曲線有明顯指數生長期,且 Ct ≤32; 以上條件應同時滿足,否則實驗視為無效。


    牛腺病毒3型(BAV-3)試劑盒(熒光-PCR法)【注意事項】

    ? 所有操作嚴格按照說明書進行;檢驗過程中,參照《GB/T 27403 實驗室質量控制規范 食品分子生物學檢測》的規定進行。

    ? 試劑盒內各種組分使用前應自然融化,混勻并短暫離心;

    ? 反應液應避光保存;

    ? 反應中盡量避免氣泡存在,管蓋需蓋緊;

    ? 使用一次性吸頭、一次性手套和各區工作服;

    ? 樣本處理、試劑配制、加樣需在不同區進行,以免交叉污染;

    ? 實驗完畢后用 10%次氯酸或 75%酒精或紫外燈處理工作臺和移液器;

    ? 試劑盒里所有物品應視為污染物對待,并按照《微生物生物醫學實驗室生物安全   通則》進行處理。

    滬崢PCR優勢:

       1.   特異性:所有產品使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析,經過GenBank及自建龐大數據庫的比對,確保
    所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段,可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測。

       2.   重現性:該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證。

       3.   靈敏性:該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。

       4.   實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實現對臨床樣品及其他環境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。

      



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